肾活检病理检查对于肾脏疾病的临床诊断、指导治疗、预后判断意义重大，而目前国内对肾活检病理诊断的整套流程尚缺乏统一规范。本专家共识的目的在于制定我国肾活检病理检查的操作规范，从肾活检取材、病理染色、病理检查观察项目等各方面，分别提出光镜、免疫荧光、电镜三种检查的描述规范，并最终整合为肾活检病理诊断报告模板，以供国内同行参考借鉴。
肾活检取材和病理染色
肾活检取材
经皮肾活检穿刺技术常采用切割式和抽吸式两种方法。穿刺针以16G为主，也可选择18G或14G，尽量避免使用内径过细的穿刺针，否则可能导致制片及诊断困难。
肾活检要求取至少两条肾组织，一是使病变更具代表性，二是可以获取足够的肾小球。如观察到取材不充分（标本为髓质或以髓质为主），应继续取材。合格的肾活检标本应包括肾皮质、皮髓交界部位，保证有足够的肾小球、肾间质以及血管。光镜需要至少8-10个肾小球才能满足诊断条件，10个肾小球更好，20-25个肾小球更理想。免疫荧光或免疫组化至少2个肾小球（以3-5个肾小球为宜），电镜至少1个肾小球（以2-3个肾小球为宜）。肾穿刺单针取组织过长，出血并发症发生率增加，合适的组织长度以1.0-1.5cm为宜。
肾穿刺病理取材时病理技术员必须到现场对组织进行分取，需记录穿刺针数及所取组织的条数和长度，实穿和空穿针数，并快速对组织进行正确的分割和处理，记录分取后送检光镜、冰冻和电镜的组织条数及长度。有条件的单位建议在解剖显微镜观察下进行组织分割，以保证送检组织肾小球数目。如因各种因素导致取材不佳时，应根据肾活检目的及临床倾向性分配标本。如临床疑诊系统性红斑狼疮，肾活检目的倾向于明确诊断，应保证有足够的免疫荧光标本；如果倾向于狼疮性肾炎的分型，则应保证光镜有充分的组织；如怀疑薄基底膜肾病、Alport综合征或者某些特殊沉积病等需电镜确诊，应确保分配给电镜的组织有肾小球。如果技术员不能到现场，需对标本处理者进行严格培训。组织处理时应注意：动作轻柔，避免拉伸和钳夹组织；在蜡板上切割组织，刀片应锋利，避免挤压组织变形；光镜、冰冻和电镜组织应有专用镊子，避免固定液交叉污染而影响组织结构和染色结果。光镜组织通常使用4%中性甲醛（又称10%福尔马林）进行固定，如怀疑为结晶性病变（如尿酸结晶等）可使用酒精固定并在染色过程中避免使用有机溶剂，以避免结晶被溶解。冰冻组织分取后，有条件的单位将组织用OCT包埋并使用液氮罐运送标本至病理实验室，无液氮罐的单位可使用盐水浸泡纱布包裹肾组织放入充满冰块的保温容器中尽快送至病理实验室进行处理，对于与病理实验室距离较远（如不同城市）的单位可用“Zeus”等介质充分浸泡肾组织送至病理实验室进行冰冻切片。电镜主要观察组织的微细结构和细胞的超微结构，在分取电镜组织时应注意：在冷板上分离电镜组织，用锋利的刀片切取组织，迅速浸入4℃保存的电镜固定液中。组织块应1mm3，可以切取3-4块以确保有肾小球。电镜组织固定包括前固定和后固定，前固定通常采用2-4%戊二醛，或1-4%多聚甲醛，后固定采用1%四氧化锇。对于不能进行电镜检查的单位，应按电镜组织的要求留取标本外送检查。
肾组织光镜染色
光镜组织处理后石蜡切片厚度以1.5-2μm为宜。连续切片15到20张后按顺序编号，每张切片上有2?3个切面。关于染色切片的选择不同单位有不同做法，但总体上保证染2-3套切片，中间预留白片用于后期需要对组织行其他特殊免疫荧光或免疫组化染色，以辅助或明确诊断。如可选取第1、2、5和6张切片进行一套常规染色，保留第3、4、7和8张白片，后面以此类推可以再染1-2套切片。常规染色项目包括苏木素-伊红（HE）染色，PAS染色（PAS），Masson-Trichrome三色染色以及银染色，银染色法包括PASM（Periodicacid-silvermethenamine，PASM），或PASM-Masson套染，或JONES染色法。推荐使用PASM-Masson套染，不仅能很好观察基底膜病变，同时较好反映免疫复合物和坏死性病变。不同染色方法显示的组织结构特征各有不同，因此用以观察的目的也有所区别。
HE染色显示各种细胞核呈蓝色，细胞质呈红色，主要用于观察细胞的种类和数量、坏死及管型成分。观察的病变包括：肾小球的增生、坏死及渗出性病变，肾小管上皮细胞损伤，间质水肿、间质出血、炎细胞浸润、血管炎症等。
PAS染色显示基底膜、系膜基质、糖原及糖蛋白呈紫红色，细胞核呈蓝色，能很好的显示肾小球和肾小管的基底膜，主要用于观察肾组织的基本结构，进而发现病变，判断病变性质、累及部位和轻重程度，同时根据基底膜轮廓还能判断固有细胞种类。观察的病变包括：肾小球基底膜增厚，毛细血管袢塌陷，包曼囊壁病变，透明滴，硬化，系膜细胞和基质增多，系膜溶解，毛细血管袢内/外增殖；肾小管上皮细胞内蛋白吸收滴，肾小管基底膜增厚，肾小管炎；血管透明变性，动脉内弹力层分层等。
Masson-Trichrome三色染色显示基底膜、系膜基质和型胶原呈绿色（或蓝色，取决于使用亮绿或甲苯胺蓝），免疫复合物、纤维素样坏死、血栓均呈红色，细胞核呈蓝黑色，主要用于观察坏死性病变、免疫复合物沉积。观察的病变包括：肾小球免疫复合物沉积，血栓，纤维蛋白，血小板；肾小管萎缩，间质纤维化；血管血栓等。
PASM-Masson染色显示基底膜和系膜基质呈棕黑色，细胞质及免疫复合物呈红色，胶原呈绿色/或蓝色（取决于套染中使用亮绿或甲苯胺蓝），该染色对肾小球结构的显示较PAS染色更为精细，主要用于观察基底膜，免疫复合物及特殊沉积物。观察的病变包括：肾小球基底膜“钉突”和空泡，基底膜双轨，基底膜和包曼囊壁断裂，间质纤维化和动脉内弹力层分层等。
因大多数肾脏疾病是免疫复合物介导的疾病，病理表现复杂多样，上述不同染色反映不同病变和性质，各有优势，互为补充，只有四种染色齐全，才能全面观察组织病变。如果肾活检光镜取材肾小球数目太少，需用冰冻切片补染PAS和HE染色以辅助观察组织形态学改变来进一步明确诊断，如果仍不能解决问题，则需要重新肾穿刺获取组织。
除以上常规染色外，一些特殊疾病的诊断还需结合其他光镜染色方法作为补充。比如刚果红染色是诊断淀粉样变性的重要手段，刚果红染色阳性物质在偏振光显微镜下呈苹果绿双折光，因此建议在光学显微镜上配置起偏和检偏装置，组成偏光显微镜，以减少刚果红染色时出现的假阳性。另外偏光显微镜对一些组织中的结晶物是否具有折光性，可作为对沉积物的鉴别，如草酸钙有折光性，而磷酸钙则无折光性。甲苯胺蓝染色则用于Fabry病和轻链近端肾小管病的筛查。普鲁士蓝染色常用于细胞内吞噬的三价铁盐的定性和定位检查，因此主要用于鉴别肾小管上皮细胞内的含铁血黄素。VonKonsa染色主要用于显示病理组织中各种钙盐沉着，比如沉积于肾组织中的磷酸钙、草酸钙等。特殊染色如刚果红、普鲁士蓝等切片厚度宜在5μm，以保证阳性率。如怀疑早期淀粉样变性，可考虑8-10μm切片。
肾组织免疫荧光和/或免疫组化染色
许多肾脏疾病，尤其是肾小球疾病的病因和发病机制复杂，多数情况下有免疫学机制参与，近些年来逐渐受到
本文编辑：佚名
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